O diagnóstico de acromegalia é bastante fácil (mas só quando você pensa a respeito), pois envolve fazer um exame de sangue para determinar o nível de GH e IGF-1. Na acromegalia, há um nível elevado de IGF-1 e GH, sabendo-se que a secreção de GH é normalmente intermitente, mas na acromegalia é sempre elevada porque não é mais regulada. O diagnóstico laboratorial definitivo é baseado no teste de glicose. Como a glicose normalmente diminui a secreção de GH, a administração oral de glicose permite detectar, por sucessivos exames de sangue, que, na acromegalia, a secreção do hormônio do crescimento permanece elevada.

Confirmada a hipersecreção de GH, é necessário encontrar sua origem. Hoje, o padrão-ouro é uma ressonância magnética do cérebro que pode mostrar um tumor na glândula pituitária. Em casos muito raros, é um tumor localizado em outro lugar (mais frequentemente no cérebro, pulmão ou pâncreas) que secreta outro hormônio que atua na glândula pituitária, GHRH, que estimula a produção de GH. Uma avaliação mais extensa é então realizada para encontrar a origem dessa secreção anormal.