A técnica de ensaio de imunoabsorção enzimática ligada - em inglês Enzyme-Linked Immuno Assay - ou teste ELISA é um teste imunológico que permite a detecção ou o ensaio de moléculas em uma amostra biológica. Foi conceitualizado e desenvolvido por dois cientistas suecos, Peter Perlmann e Eva Engvall na Universidade de Estocolmo em 1971.

As moléculas testadas pelo método ELISA são geralmente proteínas. E os tipos de amostra incluem materiais biológicos fluidos - plasma, soro, urina, transpirante -, meios de cultura de células ou uma proteína recombinante - proteína produzida por uma célula cujo material genético foi alterado por recombinação genética - purificada em solução.

O teste ELISA é usado principalmente em imunologia para detectar e / ou medir a presença de proteínas, anticorpos ou antígenos em uma amostra. Este teste sorológico detecta em particular os anticorpos produzidos pelo corpo em resposta à contaminação viral.

O uso de anticorpos para o diagnóstico de doenças infecciosas representa um método específico e rápido. A técnica ELISA é uma técnica imunoenzimática que permite visualizar, a partir de uma amostra biológica, as reações entre um antígeno - corpo considerado estranho ao organismo vivo - e um anticorpo por reação de cor produzida por um marcador enzimático - geralmente fosfatase alcalina e peroxidase - previamente ligadas ao anticorpo. A reação de cor confirma a identificação da bactéria isolada ou a presença do vírus desejado e a intensidade da cor dá uma indicação da quantidade de antígenos ou anticorpos na amostra dada.

Existem quatro tipos principais de teste ELISA:

• ELISA direto, torna possível detectar ou medir anticorpos. Ele usa apenas um anticorpo primário;
• ELISA indireto, o mais utilizado, também permite detectar ou testar anticorpos. Ele usa um anticorpo secundário que lhe dá melhor sensibilidade do que o ELISA direto;
• ELISA em competição, permite a dosagem de antígenos. Produzido por competição por ligações, não usa enzima;
• ELISA "em sanduíche", permite a dosagem de antígenos. Essa técnica é comumente usada em pesquisas.

O teste ELISA é usado para:

• Encontrar e medir anticorpos em sorologia para diagnóstico de doenças infecciosas: virologia, parasitologia, bacteriologia, etc .;
• Doses de proteínas em baixas concentrações: dosagens específicas de certas proteínas plasmáticas (imunoglobulina E (IgE), ferritina, hormônios protéicos, etc.), marcadores tumorais, etc.;
• Dosear pequenas moléculas: hormônios esteróides, hormônios da tireóide, drogas ...

O teste ELISA é usado em particular para diagnosticar muitas doenças infecciosas:

Doenças Sexualmente Transmissíveis (DSTs)

Incluindo hepatite, sífilis, clamídia e HIV. Recomendado pelas autoridades de saúde, é o principal teste de rastreamento da AIDS: mostra a presença de anticorpos anti-HIV e do antígeno p24 seis semanas após a infecção.

Doenças regionais ou endêmicas

Febre amarela, doença do vírus de Marburg (MVM), Ladengue, doença de Lyme, Chikungunya, febre do Vale do Rift, Ebola, febre de Lassa, etc.

O Covid-19

A ser realizado mais de 2 a 3 semanas após o início dos sintomas, o teste ELISA permite identificar, em menos de uma hora, a presença de anticorpos anti-SARS-CoV-2.

Patógenos virais que causam infecções pré-natais

Toxoplasmose, rubéola, citomegalovírus, herpes simplex, por exemplo.

Outros casos

Mas ele também encontrou aplicativos na detecção:

• Gravidezes;
• Doenças autoimunes;
• Alergênicos alimentares: a determinação quantitativa das imunoglobulinas E totais (IgE) auxilia na avaliação e tratamento das alergias;
• Distúrbios hormonais;
• Marcadores tumorais;
• Vírus de plantas;
• E muitos mais

Como parte da detecção de anticorpos anti-SARS-CoV-2, um estudo piloto realizado em agosto de 2020 pelo Institut Pasteur, o CNRS, o Inserm e a Universidade de Paris confirma a confiabilidade do teste ELISA: ambos os testes ELISA testaram a proteína N inteira do SARS-CoV-2 (ELISA N) ou o domínio extracelular do pico do vírus (S) como antígenos alvo. Essa técnica permitiria a identificação de anticorpos em mais de 90% dos casos, com uma taxa de falso-positivo muito baixa de 1%.

Realizados em laboratórios de análises mediante receita médica, os testes Elisa custam cerca de 10 euros e são reembolsados ​​a 100% pelo Seguro de Saúde.

Realizados em centros gratuitos de informação, triagem e diagnóstico (CeGIDD), podem ser gratuitos para HIV e SARS-CoV-2.